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摘要:本文件规定了蝴蝶兰组织培养的技术要求、操作步骤、培养条件和质量控制方法。本文件适用于蝴蝶兰的组织培养生产及质量管理。
Title:Technical Regulations for Tissue Culture of Butterfly Orchid
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:65.020.01
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拓展解读
DB45/T 1588-2017《蝴蝶兰组织培养技术规程》是一项广西壮族自治区地方标准,对蝴蝶兰的组织培养过程进行了规范。以下选取部分关键条款进行深度解读:
在材料选择方面,标准指出外植体应选用无病虫害、健壮的母株上生长良好的叶片或茎尖作为外植体。这一步骤至关重要,因为健康的外植体能有效提高组织培养的成功率并减少污染风险。
关于培养基制备,标准强调使用MS基本培养基,并根据需要添加植物生长调节剂如6-BA和NAA。例如,当诱导愈伤组织时,推荐6-BA浓度为1.0mg/L,NAA为0.1mg/L;而在分化芽阶段,则需调整6-BA至0.5mg/L,NAA降至0.05mg/L。这种配比变化有助于控制植物细胞分裂与分化的方向。
灭菌处理环节要求将采集后的外植体先用70%酒精浸泡30秒,再用0.1%升汞溶液消毒8-10分钟,最后用无菌水冲洗5次以上。此过程不仅能够杀灭表面附着的微生物,还能避免过度消毒对植物组织造成伤害。
在继代培养过程中,定期更换培养基是保持细胞活力的关键。标准建议每隔20-25天进行一次继代操作,并注意观察培养瓶内的情况,一旦发现污染迹象立即隔离处理。
此外,标准还特别提到温度控制的重要性,整个培养过程需维持在25±2℃恒温条件下,同时保证每天12小时光照,光照强度保持在2000-2500lux范围内。这样的环境条件可以模拟自然生长状态,促进蝴蝶兰组织健康发育。
通过严格遵循这些规定,可以显著提升蝴蝶兰组织培养的成功率,为大规模繁育优质种苗提供技术支持。