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摘要:本文件规定了利用简单重复序列(SSR)标记技术进行花生品种真实性与纯度鉴定的方法,包括样品的采集、DNA提取、PCR扩增、电泳检测及结果分析等内容。本文件适用于花生种子生产、经营和管理过程中品种真实性和纯度的鉴定。
Title:Peanut Variety Authenticity and Purity Identification by SSR Method
中国标准分类号:B 04
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB13/T 2598-2017是河北省地方标准,规定了利用SSR分子标记技术对花生品种真实性与纯度进行鉴定的方法。以下是对该标准中一些重要条文的详细解读:
1. 范围:本标准适用于通过SSR标记检测花生品种的真实性与纯度鉴定。明确了适用范围和目的。
2. 规范性引用文件:列出了GB/T 19541等规范性文件。这些文件为本标准提供了必要的技术支持和参考依据。
3. 术语和定义:给出了SSR标记、等位基因、多态性等专业术语的定义。如\"SSR标记\"是指简单序列重复标记,\"等位基因\"是指位于同源染色体相同位置上控制同一性状的不同形式的基因。
4. 样品采集与DNA提取:要求样品应具有代表性,且应在适宜时期采集。DNA提取应采用适合花生种子或叶片组织的方法,并确保提取的DNA质量满足后续实验需求。
5. SSR引物设计与筛选:推荐使用已发表的高质量SSR引物,同时强调引物需经过严格筛选以保证扩增效果良好。此外还提到引物序列应公开可查。
6. PCR反应体系与条件:具体规定了反应体系组成成分及其浓度、退火温度等关键参数。例如,PCR反应总体积通常设定为20μL左右,其中包含适当量的模板DNA、正向和反向引物以及各种酶类物质。
7. 电泳检测:介绍了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)或毛细管电泳技术的应用。对于每对引物扩增出的结果图谱需要清晰可见且分辨率高。
8. 数据分析:指出每个样本至少使用三个独立重复实验所得结果来进行统计学处理。当两个品种间存在一个及以上差异位点时,则认为它们属于不同品种。
9. 结果判定:根据实际观察到的数据情况作出最终结论。如果待测样品与目标品种之间没有显著差异,则可判定为真实;反之则视为不真实。
以上就是DB13/T 2598-2017中几个核心部分的内容解析。希望对你有所帮助!