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资源简介
摘要：本文件规定了海洋贝类中片形科吸虫的PCR检测方法，包括样品处理、DNA提取、PCR扩增及结果分析等步骤。本文件适用于海洋贝类中片形科吸虫的快速检测与鉴定。
Title：Marine Bivalve Fasciolariidae PCR Detection Method
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：67.120 -
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拓展解读
《TCAOE 74-2024与旧版标准中样品前处理方式的差异解析》
在TCAOE 74-2024《海洋贝类片形科吸虫PCR检测方法》中，样品前处理部分相较于旧版标准有显著变化。旧版标准中，样品前处理主要依赖机械破碎法，这种方法虽然简单易行，但存在样本均一性差、核酸提取效率低等问题。而在新版标准中，推荐使用超声波破碎结合化学裂解的方法。
超声波破碎技术能够更高效地破坏细胞壁和细胞膜结构，使细胞内容物充分释放。同时，加入特定的化学裂解剂可以进一步提高核酸的释放效率。这种组合方式不仅提升了核酸的提取质量，还增强了检测结果的准确性。
以检测海洋贝类中的片形科吸虫为例，在样品前处理过程中，首先将样品置于含有裂解液的离心管中，通过超声波破碎仪进行处理。超声波频率设定为40kHz，持续时间为15分钟，期间需间隔冷却，防止样本过热影响后续实验。随后加入蛋白酶K，于56℃条件下消化3小时，以彻底去除蛋白质等杂质。最后经过离心分离上清液，并采用专用试剂盒提取核酸。
这一改进使得样品前处理过程更加科学合理，为后续PCR扩增提供了高质量的模板DNA，从而提高了整个检测流程的灵敏度和特异性。
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