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资源简介
摘要：本文件规定了饲料中沙门氏菌的实时荧光PCR检测方法，包括样品处理、核酸提取、扩增及结果判定等内容。本文件适用于饲料及其原料中沙门氏菌的快速检测。
Title：Feed - Determination of Salmonella - Real-time Fluorescent PCR Method
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：67.040 -
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拓展解读
DB22/T 2052-2014《饲料中沙门氏菌测定 实时荧光PCR方法》是一项吉林省地方标准，用于饲料中沙门氏菌的检测。以下是对该标准中一些关键条文的详细解读：
1. **适用范围**：本标准规定了使用实时荧光PCR技术检测饲料中沙门氏菌的方法。适用于各类饲料产品中沙门氏菌的定性检测。
2. **术语和定义**：
- **实时荧光PCR**：一种利用荧光信号变化来实时监测PCR扩增过程的技术。
- **阳性对照**：含有已知浓度目标DNA的标准样品，在实验中用于验证试剂的有效性和检测系统的灵敏度。
- **阴性对照**：不含任何目标DNA的样品，用于排除污染的可能性。
3. **样品采集与处理**：
- 样品应具有代表性，并按照相关采样规范进行采集。
- 样品处理过程中需注意防止污染，确保样本的真实性和可靠性。
4. **核酸提取**：
- 使用适当的试剂盒或方法从样品中提取DNA。
- 提取后的DNA质量直接影响检测结果的准确性，因此要保证提取效率高且无杂质。
5. **PCR反应体系建立**：
- 包括引物、探针的设计与合成，以及反应缓冲液的选择。
- 引物和探针的设计应特异性良好，能够准确识别目标序列。
6. **实时荧光PCR扩增条件**：
- 设定合适的退火温度、延伸时间等参数，以获得最佳扩增效果。
- 扩增曲线分析是判断结果的重要依据，需仔细观察扩增曲线形态。
7. **结果判定**：
- 若Ct值小于阈值且扩增曲线呈典型S型，则判为阳性。
- 若Ct值大于阈值或扩增曲线不符合要求，则判为阴性。
8. **质量控制**：
- 每次实验均需设立阳性对照和阴性对照。
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最后更新时间 2025-06-04
