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摘要:本文件规定了动物尿液中沙丁胺醇的测定方法——酶联免疫吸附法。本文件适用于牛、羊等动物尿液中沙丁胺醇残留量的检测。
Title:Determination of Salbutamol in Animal Urine by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:67.120
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拓展解读
DB65/T 3554-2013《动物尿液中沙丁胺醇的测定 酶联免疫吸附法》是一项新疆维吾尔自治区的地方标准,该标准规定了使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物尿液中沙丁胺醇残留量的技术要求。以下是对标准中一些重要条文的详细解读:
范围
标准适用于动物尿液样品中沙丁胺醇残留量的定性与定量分析。这一范围明确了该方法的应用领域,即针对动物尿液样本,而非其他生物样本或环境样本。
规范性引用文件
标准引用了GB/T 6682《分析实验室用水规格和试验方法》等规范性文件。这意味着在执行本标准时,需要遵循这些基础性的国家标准,确保实验用水的质量符合要求。
原理
本方法基于抗原抗体特异性结合原理。通过将沙丁胺醇抗原包被于固相载体上,加入待测样品后,样品中的沙丁胺醇会与固相上的抗原竞争结合抗体,最后通过酶标二抗显色来判断结果。此部分强调了技术的核心机制,即利用免疫学原理实现对目标物质的识别。
试剂与材料
标准详细列出了所需的所有试剂及材料,并对其纯度提出了具体要求。例如,要求使用的缓冲液需达到一定的pH值稳定性,这对于保证实验结果的准确性至关重要。
仪器设备
除了化学试剂外,还列举了必要的仪器设备清单,包括但不限于酶标仪、洗板机等。每种设备的功能描述有助于使用者选择合适的设备以满足测试需求。
样品采集与处理
样品采集应按照相关规程进行,确保样品具有代表性且未受到污染。对于尿液样品,需及时冷藏保存并尽快完成前处理步骤,如离心去除杂质等操作。
检测步骤
从样品稀释开始直至最终读取吸光度值结束,整个过程都进行了详尽说明。特别注意的是,在每次实验前都需要设置阳性对照组、阴性对照组以及标准曲线,以此作为判断结果可靠性的依据。
结果计算
采用四参数逻辑回归模型拟合标准曲线,然后根据未知样品的吸光度值查找对应浓度值。同时提供了公式用于计算回收率和变异系数等关键指标,帮助评估方法性能。
精密度与准确度
通过对多个实验室间协作试验的数据统计分析得出,该方法具备良好的重复性和再现性。此外,不同浓度水平下的回收率均处于合理范围内,表明其能够有效反映实际状况。
安全注意事项
最后提醒操作人员遵守实验室安全准则,妥善处置废弃物,并采取适当措施防止交叉污染。特别是在处理含有潜在有害物质的样品时,更应该加强个人防护意识。
以上是对DB65/T 3554-2013中若干重要条款的深入解析,希望对你有所帮助!