DB34T 1891-2013 活毒疫苗中禽白血病病毒污染检测技术规程

DB34/T 1891-2013《活毒疫苗中禽白血病病毒污染检测技术规程》是安徽省地方标准，规定了检测活毒疫苗中禽白血病病毒污染的技术要求。以下选取几个关键条款进行详细解读：

5.1 样品采集：样品应从生产过程中的不同阶段采集，包括种子细胞、生产用鸡胚以及最终产品。每批样品至少采集三个独立样本以确保检测结果的代表性。

6.1 RNA提取：使用高效稳定的RNA提取试剂盒，按照说明书操作提取样品中的总RNA。特别注意避免RNA降解，整个操作应在无RNA酶的环境中进行。

7.1 RT-PCR检测：采用特异性引物对禽白血病病毒基因组特定区域进行扩增。反应体系需优化，确保灵敏度和特异性。阴性和阳性对照必不可少，用于判断实验的有效性。

附录A（规范性附录）：提供了详细的RT-PCR反应条件，包括逆转录温度时间设置、预变性、退火延伸等参数。这些参数直接影响检测结果的准确性，必须严格遵循。

附录B（资料性附录）：列出了一些常见问题及解决方法，如假阳性出现可能是由于污染或引物设计不合理，假阴性则可能源于样品处理不当。此部分为实际操作提供了宝贵的参考信息。

以上内容涵盖了标准的核心检测流程和技术要点，有助于实验室准确执行检测任务，保障疫苗质量。