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摘要:本文件规定了动物尿液中β-受体激动剂测定的酶联免疫法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备、测定步骤、结果计算和表达。本文件适用于动物尿液中β-受体激动剂的定性及定量测定。
Title:Determination of Beta-Agonists in Animal Urine by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:67.120
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拓展解读
DB22/T 1609-2012《动物尿液中β-受体激动剂测定 酶联免疫法》是一项吉林省地方标准,旨在规范通过酶联免疫法检测动物尿液中β-受体激动剂残留的实验流程和技术要求。以下是对该标准中一些关键条款的详细解读:
范围与适用性
本标准适用于牛、羊、猪、马、兔和犬等动物尿液中β-受体激动剂残留量的测定。这一范围明确了该方法适用于多种家畜,但不包括禽类动物。
规范性引用文件
标准中引用了GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法以及SN/T 1837进出口动物源食品中β-兴奋剂类残留量的测定。这些引用文件为实验提供了基础的水质使用规范及进出口食品检测的相关技术指导。
原理
酶联免疫法基于抗原抗体特异性结合原理。将β-受体激动剂偶联到载体上作为包被抗原,与样品中的待测物质竞争有限的抗体结合位点。经过一系列反应后,利用酶标仪测量吸光度值来判断样品中目标物质的存在与否及其浓度。
试剂与材料
试剂的选择对于实验结果至关重要。标准规定了所需的所有试剂包括但不限于缓冲液、显色剂、终止液等,并且强调了所有试剂都必须符合相关质量要求。
仪器设备
除了基本的实验室器具外,还特别提到了酶标仪作为必要设备之一。此外,还需要恒温培养箱、离心机等辅助工具以确保实验顺利进行。
样品采集与处理
样品应从健康动物的新鲜尿液中取样,并立即置于4℃条件下保存不超过24小时。如果不能及时检测,则需冷冻保存至-20℃以下直至使用前解冻。
实验步骤
1. 准备工作:按照说明书准备好所有试剂并调整好仪器设置。
2. 包被:将包被液加入微孔板中,每孔加注适量样本。
3. 封闭:加入封闭液后摇匀,在指定温度下孵育一定时间。
4. 加样:依次向每个微孔内加入不同浓度的标准品溶液或空白对照液。
5. 显色:加入底物溶液后避光放置一段时间。
6. 终止:添加终止液停止反应。
7. 测定:最后用酶标仪读取各孔OD值。
结果计算
根据标准曲线计算出样品中目标化合物的具体含量。当OD值低于最低检测限时可认为未检出。
以上是对DB22/T 1609-2012标准部分内容的重点解读,希望对您有所帮助!