TNAIA 0265-2023 羊场致病性大肠杆菌病诊断与 防治技术规程

摘要：本文件规定了羊场致病性大肠杆菌病的诊断方法、预防措施及治疗方案。本文件适用于羊场致病性大肠杆菌病的防控与管理。
Title：Technical Specification for Diagnosis and Control of Pathogenic Escherichia coli in Sheep Farms
中国标准分类号：B 46
国际标准分类号：65.020

今天我来详细解读一下《TNAIA 0265-2023羊场致病性大肠杆菌病诊断与防治技术规程》中新旧版本的重要差异之一——病原分离培养方法的变化。

在旧版标准中，病原分离培养主要依赖传统的肠道选择性培养基，如麦康凯琼脂。然而，新版标准引入了分子生物学方法，特别是PCR技术的应用。这一变化不仅提高了检测的敏感性和特异性，还大大缩短了检测时间。

具体来说，新版标准推荐使用特异性引物对目标基因进行扩增。首先从疑似病料中提取DNA，然后按照试剂盒说明书配置反应体系并设置扩增条件。通常包括预变性94℃ 5分钟；变性94℃ 30秒，退火55℃ 30秒，延伸72℃ 1分钟，共30个循环；最后延伸72℃ 10分钟。扩增产物通过凝胶电泳检测，出现预期大小条带即可判定为阳性。

这种方法的优势在于能够快速准确地鉴定出致病性大肠杆菌，有助于及时采取防控措施，减少疾病传播风险。同时，它也减少了传统培养法可能带来的假阴性问题，特别是在样本量较少或者污染较严重的情况下。

总之，新版标准通过引入先进的分子检测手段，显著提升了诊断效率和准确性，这对于保障羊群健康具有重要意义。希望养殖户能充分认识到这一点，并在实际生产中加以应用。