TCVMA 129-2023 口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体竞争磁微粒CLIA检测方法

摘要：本文件规定了口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的竞争磁微粒化学发光免疫分析（CLIA）检测方法的技术要求、操作步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于口蹄疫病毒感染的血清学诊断及相关研究。
Title：Detection Method of Foot-and-Mouth Disease Virus Non-Structural Protein 3ABC Antibodies by Competitive Magnetic Microparticle CLIA
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：67.120

本文以TCVMA 129-2023与旧版标准的差异为切入点，聚焦于“3ABC抗体检测样本前处理条件”的变化进行深入分析。

在旧版标准中，样本前处理仅要求使用生理盐水稀释待检血清，但新版标准增加了乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）作为抗凝剂，并对稀释倍数进行了优化。具体来说，样本需先用含2% EDTA-Na2的PBS缓冲液按1:4比例稀释，再进一步稀释至1:80用于检测。

这一调整源于大量实验数据表明，添加EDTA-Na2能有效防止血液样本凝固过程中蛋白质变性，同时降低血红蛋白对检测信号的干扰。通过对比试验发现，采用新方法后检测灵敏度提高了约20%，特异性保持不变。

实际操作时，应严格按照以下步骤执行：首先取50μL全血样本加入200μL含2% EDTA-Na2的PBS缓冲液中混匀；静置10分钟后取10μL稀释后的样本加入990μL PBS缓冲液中再次稀释，最终得到1:80的工作液。此过程需在室温下避光操作，确保整个流程规范准确。

该改进对于提高检测结果的可靠性具有重要意义，特别是在大规模筛查场景下，能够显著提升检测效率和准确性。