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摘要:本文件规定了猪瘟病毒间接磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)抗体检测的方法原理、试剂与材料要求、仪器设备、操作步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于猪瘟病毒感染的血清学诊断及相关研究工作。
Title:Indirect Magnetic Microparticle CLIA Antibody Detection Method for Classical Swine Fever Virus
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:11.220
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拓展解读
《TCVMA 130-2023中猪瘟病毒间接磁微粒CLIA抗体检测的关键变化与应用》
在TCVMA 130-2023版中,关于猪瘟病毒间接磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)抗体检测的重要变化之一是增加了对磁微粒表面包被抗原种类的规定。这一调整直接影响了检测结果的准确性和特异性。
在旧版标准中,对磁微粒表面包被抗原没有具体要求,实验室可以根据自身条件选择合适的抗原。然而,在实际操作过程中发现,不同抗原会导致检测灵敏度和特异性的差异。因此,新版标准明确规定磁微粒表面应包被猪瘟病毒E2蛋白作为抗原。
这一规定的实施具有重要意义。首先,猪瘟病毒E2蛋白是病毒表面重要的结构蛋白,能够激发机体产生高水平的中和抗体,使用其作为包被抗原可以显著提高检测的灵敏度。其次,E2蛋白抗原具有良好的稳定性,能够在较宽的温度范围内保持活性,从而保证检测结果的可靠性。此外,E2蛋白抗原的特异性较强,能够有效避免非特异性反应,减少假阳性结果的发生。
为了正确应用这一规定,实验室需要严格控制磁微粒表面包被E2蛋白的浓度和时间。通常情况下,包被浓度应在5-10 μg/mL之间,包被时间为12-18小时,温度控制在4℃左右。包被完成后,还需进行封闭处理,以进一步提高抗原的稳定性和特异性。封闭液一般选用含1% BSA的PBS溶液,封闭时间为1-2小时,温度控制在室温。
通过这一改进,猪瘟病毒间接磁微粒CLIA抗体检测方法的性能得到了显著提升,为猪瘟的防控提供了更加可靠的检测手段。