TCI 157-2023 甲壳动物重要病原体微阵列基因芯片检测方法

摘要：本文件规定了甲壳动物重要病原体微阵列基因芯片检测方法的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、数据分析及结果报告。本文件适用于甲壳动物中重要病原体的快速筛查和鉴定。
Title：Detection Method of Microarray Gene Chip for Important Pathogens of Crustaceans
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：65.020.30

TCI 157-2023《甲壳动物重要病原体微阵列基因芯片检测方法》相较于旧版标准在检测灵敏度、特异性及操作便捷性上有了显著提升。其中，关于“多重PCR扩增体系优化”这一条文的变化尤为值得关注。

在旧版标准中，多重PCR扩增体系的建立较为基础，仅能同时检测少数几种目标病原体DNA片段。而在新版标准中，通过引入更高效的引物设计算法以及优化反应条件（如退火温度、镁离子浓度等），使得单次反应能够同时检测多达十种以上甲壳动物常见病原体。这种改进不仅提高了检测效率，还大幅降低了样本处理成本。

以对虾白斑综合症病毒(WSSV)和桃拉病毒(TSV)这两种重要病原体为例，在实际应用时应严格按照新版标准执行。首先需制备高质量的核酸样品，确保提取过程中避免RNA降解。接着按照标准要求配置含有特异性引物组与荧光探针的混合液，并加入适量模板DNA。将上述混合物置于实时定量PCR仪中运行，设定好程序参数后启动检测流程。最终依据荧光信号强度判断结果，阳性样品会显示出明显的扩增曲线，而阴性对照则无任何变化。

此方法的优点在于它能够在较短时间内完成大量样本筛查工作，尤其适用于水产养殖业中大规模监测场景。此外，由于采用了标准化的操作步骤，不同实验室间的数据具有较好的可比性和重复性，这对于制定科学合理的防控措施至关重要。总之，新版标准对于促进甲壳动物健康养殖、保障食品安全等方面发挥了积极作用。

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