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摘要:本文件规定了动物中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体检测的技术要求、方法步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于实验室对动物体内中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体的检测与研究。
Title:Technical Specification for Detection of Neutralizing Antibodies against MERS Coronavirus in Animals
中国标准分类号:C46
国际标准分类号:11.020
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拓展解读
中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)作为一种高致病性的人畜共患病原体,其相关检测技术对于防控疫情具有重要意义。在《TCVDA 4-2022 动物中东呼吸综合征冠状病毒中和抗体检测技术》这一标准中,有一项关键变化值得深入探讨,即“细胞病变效应(CPE)观察判定法”的优化。
在旧版标准中,细胞病变效应的判定主要依赖于显微镜下人工观察细胞形态的变化。然而,这种传统方法存在主观性强、效率低下的问题,尤其是在大规模样本筛查时,容易导致结果偏差。新版标准对此进行了改进,引入了基于图像分析系统的自动化判读方式。该系统通过预先设定的算法模型,能够快速准确地识别并量化细胞病变的程度,从而提高检测的一致性和可靠性。
具体应用时,首先需要准备符合要求的Vero E6细胞株,并将其接种于96孔板内。待细胞贴壁后,加入不同稀释度的待测血清样品与MERS-CoV病毒悬液混合孵育一段时间后再次接种到细胞上。随后,利用自动化的显微成像设备对各孔中的细胞状态进行拍摄记录。软件会根据预存的标准参数对图片进行处理,包括但不限于对比度调整、边缘检测等步骤,最终生成一份包含每个样本细胞存活率百分比的数据报告。当某个样本对应的细胞存活率低于设定阈值,则可判断该样本含有中和活性抗体。
此方法不仅大幅缩短了操作时间,还减少了人为因素带来的误差,特别适合用于科研机构及公共卫生部门开展大规模流行病学调查工作。同时,它也为后续开发更先进的诊断试剂提供了技术支持。总之,《TCVDA 4-2022》中关于细胞病变效应观察判定法的修订体现了标准化工作紧跟科技进步的步伐,为提升我国动物源性传染病防控能力做出了积极贡献。