资源简介
摘要:本文件规定了RNA定量测序的样品准备、文库构建、测序、数据分析和质量控制的技术要求和操作流程。本文件适用于从事RNA定量测序的研究机构、医疗机构及相关企业。
Title:Technical Specification for RNA Quantitative Sequencing
中国标准分类号:C46
国际标准分类号:11.080
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拓展解读
TCI 121-2023《RNA定量测序技术规程》相较于旧版标准,在多个方面进行了优化和更新。本文将聚焦于“样本质量控制”这一关键环节,详细解读新标准中关于RNA完整性评估的重要变化及其应用方法。
在旧版标准中,RNA完整性主要通过电泳图谱直观判断,缺乏量化指标。而新版标准引入了RNA完整性数值(RIN值)作为统一衡量标准。RIN值是基于电泳图谱自动计算得出的数值,范围从1到10,数值越高表示RNA完整性越好。这一改变不仅提高了检测结果的一致性,还便于不同实验室之间的数据对比。
具体应用时,实验室需配备具备RIN值分析功能的高端电泳仪。首先,按照标准要求制备样品,确保提取的RNA无降解、无污染。接着,使用该设备对样品进行检测,并记录RIN值。如果RIN值低于设定阈值,则需重新提取或处理样品,直至达到实验需求。例如,在高通量测序前,通常要求RIN值不低于7.5,以保证后续数据分析的准确性。
通过采用RIN值评估RNA完整性,可以有效提升RNA定量测序数据的质量,减少因样本质量问题导致的数据偏差,从而为科学研究提供更可靠的依据。