GBT 40187-2021 核酸适配体亲和性和特异性评价技术导则

GBT 40187-2021 核酸适配体亲和性和特异性评价技术导则常见问题解答

问题1：什么是核酸适配体？

核酸适配体是一类通过体外筛选技术（如SELEX）获得的单链DNA或RNA分子，能够与特定目标分子（如蛋白质、小分子等）高度结合并表现出亲和性和特异性。

问题2：GBT 40187-2021 的主要目的是什么？

GBT 40187-2021 是中国国家标准，旨在为核酸适配体的亲和性和特异性评价提供统一的技术规范，以确保结果的科学性、可重复性和可靠性。

问题3：如何评估核酸适配体的亲和性？

• 亲和性定义：指核酸适配体与其靶标分子之间的结合强度。
• 常用方法：
  • 表面等离子共振（SPR）
  • 酶联免疫吸附测定（ELISA）
  • 荧光标记结合实验
  • 等温滴定量热法（ITC）

问题4：核酸适配体的特异性如何评价？

• 特异性定义：指核酸适配体仅与目标分子结合，而不与其他非目标分子发生显著结合的能力。
• 常用方法：
  • 交叉反应测试
  • 竞争结合实验
  • 多重靶标筛选

问题5：为什么需要进行亲和性和特异性评价？

亲和性和特异性是核酸适配体功能的核心指标，直接影响其在诊断、治疗及生物传感等领域的应用效果。未经过严格评价的适配体可能导致假阳性或假阴性结果，影响研究或实际应用的准确性。

问题6：GBT 40187-2021 是否适用于所有类型的核酸适配体？

GBT 40187-2021 主要适用于基于化学合成或体外筛选技术获得的单链DNA或RNA适配体，但不包括天然存在的核酸分子。

问题7：如何选择合适的评价方法？

• 根据适配体的用途选择适合的方法，例如诊断应用需重点关注特异性，而治疗应用需关注亲和性。
• 结合实验室设备条件和成本预算，选择经济高效的方法。
• 参考相关文献和标准，选择已被验证的方法。

问题8：GBT 40187-2021 是否规定了具体的评价阈值？

GBT 40187-2021 提供了评价的标准框架，但未设定具体的阈值，具体阈值需根据实验目的和领域需求确定。

问题9：如何确保核酸适配体评价结果的可靠性？

• 严格按照GBT 40187-2021 的要求进行操作。
• 设置对照组和空白组，减少实验误差。
• 采用多种方法交叉验证结果。

问题10：核酸适配体的亲和性和特异性是否可以同时优化？

通常情况下，亲和性和特异性之间可能存在权衡关系。例如，提高亲和性可能降低特异性，反之亦然。因此，需要根据实际需求平衡两者的关系。