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资源简介
摘要:本文件规定了实验动物结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)核酸检测的样本采集、处理、提取、扩增及结果判定的方法。本文件适用于实验动物中结肠小袋纤毛虫感染的检测与诊断。
Title:Laboratory Animals - Method for Nucleic Acid Detection of Balantidium coli
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:11.120 -
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拓展解读
TCALAS 106-2021《实验动物 结肠小袋纤毛虫核酸检测方法》相较于旧版标准,在检测技术和操作细节上进行了多项优化。其中,关于核酸提取部分的变化尤为显著,这直接影响了检测的灵敏度和准确性。
在老版本中,核酸提取步骤较为简单,主要依赖于传统的化学裂解法,这种方法虽然成本低廉,但对样本质量要求较高,且容易受到杂质干扰,导致提取效率低下。而在TCALAS 106-2021中,推荐使用磁珠法进行核酸提取。这种技术通过特异性吸附DNA/RNA到磁珠表面,随后利用磁场分离纯化,具有更高的回收率和更低的污染风险。
以磁珠法为例,其具体应用步骤如下:首先将结肠小袋纤毛虫样本处理后加入含有裂解液的离心管中,充分混匀后静置一段时间使细胞破裂;接着加入预装有磁珠的离心管,再次混匀并放置几分钟让磁珠与核酸结合;然后利用外部磁场将磁珠从混合物中分离出来,并依次进行洗涤和洗脱操作,最终获得纯净的核酸样品。此过程不仅提高了核酸的质量,还减少了人工操作带来的误差,为后续PCR扩增提供了可靠的基础。
采用磁珠法核酸提取的优点显而易见。一方面,它能够有效去除蛋白质、多糖等杂质,确保核酸的高纯度;另一方面,该方法自动化程度高,适合大规模样本检测,有助于提高工作效率。因此,在实际应用时,实验室应优先选择符合TCALAS 106-2021规定的试剂盒,严格按照说明书执行每一步骤,以保证检测结果的真实性和可靠性。
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最后更新时间 2025-06-02