TCALAS 91-2020 实验动物 仙台病毒逆转录-环介导 等温扩增（RT-LAMP）检测方法

TCALAS 91-2020《实验动物 仙台病毒逆转录-环介导等温扩增（RT-LAMP）检测方法》是实验动物领域的重要标准，其中关于试剂配制和反应体系优化的内容具有显著改进。与旧版相比，新版标准在试剂组成和反应条件上更加细化，提高了检测灵敏度和特异性。

以“试剂配制”为例进行深入解读。新版标准明确了每种试剂的具体成分及配制步骤：首先，需使用高纯度的脱氧核糖核苷酸（dNTPs），确保浓度为0.8 mM；其次，引物混合液中各引物终浓度应保持一致，通常为0.2 μM至0.4 μM之间，并且需要提前进行无核酸酶水稀释并分装保存于-20℃环境中。此外，对于Bst DNA聚合酶而言，推荐选用活性更高的热启动型酶制剂，并按照说明书要求添加适量的Mg2+离子。

在实际操作过程中，应当严格按照上述规定执行，特别是在配制过程中要特别注意避免污染。例如，在制备引物时应佩戴一次性手套并使用超净工作台；而在加样环节则建议采用带滤芯吸头以防止交叉污染。通过遵循这些详细的指导原则，可以有效提升RT-LAMP检测结果的准确性和可靠性，从而更好地服务于实验动物健康监测工作。