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摘要:本文件规定了实验动物猪母系遗传结构检测的术语和定义、原理、样品采集与处理、检测方法及结果分析。本文件适用于实验动物猪的母系遗传结构鉴定及相关研究。
Title:Experimental Animals - Method for Maternal Genetic Structure Detection of Pigs
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:07.120.30
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拓展解读
实验动物猪母系遗传结构检测是保障实验动物质量的重要环节。在TCALAS 84-2020《实验动物 猪母系遗传结构检测方法》中,与旧版相比,有一项重要变化值得深入探讨:即对微卫星标记检测的具体操作要求。
以微卫星标记检测为例,在新版标准中明确规定了微卫星引物的设计原则、PCR反应体系的建立以及扩增程序的具体参数。例如,对于微卫星引物的设计,需确保其特异性高且易于区分等位基因片段长度。这不仅有助于提高检测结果的准确性,还能有效减少非特异性扩增带来的干扰。
具体应用时,首先根据目标物种已知序列信息设计引物,并通过BLAST比对确认其特异性。接着构建PCR反应体系,包括模板DNA、正向和反向引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶及缓冲液等成分。反应条件通常设定为95℃预变性5分钟,随后进行35个循环的94℃变性30秒、55℃退火30秒、72℃延伸30秒,最后在72℃延伸5分钟完成。
这一改进使得实验人员能够更加精确地识别不同品系间遗传差异,从而更好地满足实验需求,确保实验数据的真实可靠。同时,也为后续研究提供了标准化的操作流程,有利于促进该领域的发展。