资源简介
摘要:本文件规定了健康献血者外周血单个核细胞的分离、检测、制备、储存和发放等技术要求。本文件适用于健康献血者来源的单个核细胞资源的分离与储存过程。
Title:Specification for the Storage of Peripheral Blood Mononuclear Cells from Healthy Blood Donors - Part 4: Separation
中国标准分类号:C45
国际标准分类号:11.040
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拓展解读
本文以TCRHA 007-2022中关于单个核细胞分离方法的选择与应用为主题展开讨论。相较于旧版标准,新版在单个核细胞分离技术细节上有了更明确的要求。
根据TCRHA 007-2022第4部分的规定,单个核细胞分离通常采用密度梯度离心法。这一方法的核心在于选择合适的分离介质。例如,Ficoll-Hypaque溶液是常用的分离介质之一。在实际操作过程中,需严格控制血液样本与分离介质的比例以及离心参数,包括离心速度和时间。新版标准特别强调了离心速度应控制在800g左右,离心时间为30分钟,并且在此过程中要确保温度维持在18-24℃之间。这是因为温度的变化会影响细胞的存活率及分离效果。此外,还增加了对分离后单个核细胞纯度检测的具体要求,即纯度应不低于90%,并给出了具体的检测方法,如流式细胞术等。
通过这些具体的操作规范,可以有效提高单个核细胞分离的成功率,保证后续实验数据的准确性和可靠性。
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