WST 417-2013 γ-谷氨酰基转移酶催化活性浓度测定参考方法

关于WST 417-2013 γ-谷氨酰基转移酶催化活性浓度测定参考方法的常见问题解答

以下是关于WST 417-2013标准中γ-谷氨酰基转移酶（GGT）催化活性浓度测定的常见问题及其详细解答。

1. WST 417-2013是什么？

WST 417-2013是中国国家标准化管理委员会发布的关于γ-谷氨酰基转移酶催化活性浓度测定的参考方法标准，主要用于临床生化检验领域，为实验室提供了一种准确测定GGT活性的方法。

2. γ-谷氨酰基转移酶（GGT）的作用是什么？

γ-谷氨酰基转移酶是一种参与谷胱甘肽代谢的重要酶，广泛存在于肝细胞膜上。其主要功能是催化γ-谷氨酰化合物与胺类或氨基酸之间的交换反应。GGT的活性水平常用于评估肝脏健康状况，尤其是在诊断肝胆疾病时具有重要意义。

3. WST 417-2013中使用的测定原理是什么？

该标准采用连续监测法，通过测定在特定波长下底物γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺（γ-GCN)被GGT催化后生成的产物（黄色的5-氨基-2-硝基苯甲酸）的吸光度变化来计算GGT的活性浓度。

4. 测定过程中需要哪些试剂？

• γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺（γ-GCN）作为底物。
• 辅因子NADH或NADPH。
• 缓冲液（如Tris-HCl缓冲液），用于维持反应体系的pH值。
• 其他辅助试剂，如表面活性剂等。

5. 如何正确采集和保存样本？

为了确保检测结果的准确性，样本采集和保存需遵循以下步骤：

• 采样应在空腹状态下进行，避免饮食对结果的影响。
• 血液样本应尽快分离血清或血浆，并在2-8℃条件下保存。
• 如果不能及时检测，样本可冷冻保存，但需避免反复冻融。

6. WST 417-2013与传统方法相比有哪些优势？

与传统的比色法相比，WST 417-2013方法具有更高的灵敏度和特异性，能够更精确地反映GGT的活性水平。此外，该方法操作简便，适合大规模自动化检测。

7. 测定结果异常可能的原因有哪些？

• 样本采集不当或保存条件不达标。
• 仪器校准不准确或试剂过期。
• 患者存在某些病理状态，如肝硬化、胆道阻塞等。

8. 如何判断测定结果是否可靠？

结果可靠性可以通过以下方式进行验证：

• 重复实验以确认结果的一致性。
• 与其他实验室的结果进行比对。
• 结合患者的病史和其他检查指标综合分析。

9. 是否可以使用该方法检测其他物种的GGT活性？

虽然WST 417-2013标准主要是针对人类样本设计的，但在适当调整参数的情况下，也可以用于其他物种的GGT活性测定，但需注意不同物种的酶学特性可能存在差异。

10. 使用该方法时需要注意哪些安全事项？

在使用该方法时，应注意以下几点：

• 严格按照试剂说明书操作，避免试剂接触皮肤或眼睛。
• 操作过程中佩戴适当的防护装备，如手套和护目镜。
• 废弃物需按生物化学废物处理规范妥善处置。