WST 355-2011 血清甘油三酯的酶法测定

血清甘油三酯的酶法测定

血清甘油三酯（Triglyceride, TG）是血脂的重要组成部分之一，其水平与心血管疾病、糖尿病等多种代谢性疾病密切相关。因此，准确测定血清中的甘油三酯含量对于临床诊断和治疗具有重要意义。WST 355-2011 标准为酶法测定血清甘油三酯提供了科学依据和技术规范。本文将从方法原理、操作流程及注意事项三个方面对这一标准进行详细分析。

方法原理

WST 355-2011 标准采用酶法测定血清甘油三酯，其核心在于通过一系列酶促反应将甘油三酯分解并转化为可检测的产物。具体而言，该方法利用 脂酶 将甘油三酯水解为游离脂肪酸和甘油，随后通过 甘油激酶 和 磷酸甘油氧化酶 的作用进一步生成过氧化氢 (H₂O₂)。最后，过氧化物酶 (POD) 催化 H₂O₂ 与 4-氨基安替比林和酚反应，生成红色醌类化合物，其吸光度可通过分光光度计在特定波长下测量。

操作流程

• 样本准备：采集空腹静脉血样，分离血清后立即进行测定。
• 试剂配置：按照标准要求配制脂酶、甘油激酶、磷酸甘油氧化酶、过氧化物酶等试剂。
• 反应体系建立：将血清样本与试剂混合后置于恒温条件下孵育。
• 吸光度测定：在 505 nm 波长下测定反应体系的吸光度变化，并计算甘油三酯浓度。
• 结果报告：根据标准曲线计算样本中甘油三酯的含量，并以 mmol/L 为单位报告。

注意事项

为了确保测定结果的准确性，操作过程中需注意以下几点：

• 样本保存：血清样本应在低温环境下储存，避免反复冻融。
• 试剂质量：所用试剂应符合 WST 355-2011 标准要求，定期检查试剂的有效期。
• 温度控制：孵育温度需严格控制在 37°C ± 0.5°C 范围内。
• 空白对照：每次实验均需设置空白对照，以校正背景吸光度。
• 重复性验证：对同一样本进行多次测定，确保结果的可靠性和一致性。

综上所述，WST 355-2011 标准为血清甘油三酯的酶法测定提供了标准化的操作规程。通过严格的实验设计和规范的操作流程，可以有效提高测定结果的准确性，为临床诊断提供可靠的参考依据。