WST 345-2011 血清尿素测定参考方法

摘要

本文旨在探讨和分析WST 345-2011标准中关于血清尿素测定的参考方法。通过详细描述该方法的原理、操作步骤及适用范围，结合实际应用中的注意事项，为临床实验室提供可靠的检测依据。

引言

尿素是蛋白质代谢的重要产物之一，其在血液中的浓度可以反映人体的肾功能状态。准确测定血清尿素水平对于诊断肾脏疾病、评估营养状况以及监测治疗效果具有重要意义。WST 345-2011标准提出了一种基于酶法的血清尿素测定方法，该方法以其高灵敏度和特异性受到广泛关注。

方法原理

• 反应机制： WST 345-2011采用脲酶催化尿素分解生成氨和二氧化碳的过程，随后通过谷氨酸脱氢酶（GLDH）进一步将氨转化为α-酮戊二酸，最终生成NADH。
• 检测原理： 利用分光光度计测量NADH在340 nm波长下的吸光度变化，从而间接计算出尿素的浓度。

操作步骤

1. 准备试剂：包括脲酶溶液、谷氨酸脱氢酶溶液、α-酮戊二酸溶液以及NADH溶液。
2. 取样与稀释：从患者血清样本中精确吸取一定量的样本，并按照比例进行稀释。
3. 加入试剂：依次向样品管中加入脲酶溶液、谷氨酸脱氢酶溶液等试剂，确保充分混合。
4. 记录数据：使用分光光度计记录反应过程中NADH吸光度的变化。
5. 计算结果：根据标准曲线计算尿素浓度。

注意事项

• 实验环境需保持恒温，避免温度波动影响反应速率。
• 试剂应在有效期内使用，确保其活性稳定。
• 样本采集后应尽快完成检测，以减少外界因素对结果的影响。

结论

WST 345-2011标准提供的血清尿素测定方法是一种高效、可靠的技术手段，能够满足临床需求。通过严格遵循操作规程并注意细节控制，可获得准确的检测结果，为医疗决策提供科学依据。