SNT 1164.2-2003 牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验操作规程

常见问题解答 (FAQ)

SNT 1164.2-2003 牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验操作规程 是一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）抗体的重要方法。以下是关于该规程的一些常见问题及其解答。

1. 什么是微量血清中和试验？

微量血清中和试验是一种通过检测血清中和抗体的能力来判断牛是否感染牛传染性鼻气管炎病毒的方法。它利用病毒与抗体之间的特异性结合反应，通过观察病毒的抑制情况来确定抗体的存在。

2. 微量血清中和试验的主要步骤有哪些？

微量血清中和试验的主要步骤包括：

• 准备病毒悬液和标准阳性血清。
• 将待测血清进行稀释。
• 将稀释后的血清与病毒混合并孵育。
• 加入细胞培养基，观察细胞病变效应（CPE）。
• 记录结果并计算中和滴度。

3. 如何选择合适的细胞系进行实验？

根据 SNT 1164.2-2003 标准，通常使用 MDBK（Madin-Darby Bovine Kidney）细胞系作为敏感细胞。这种细胞对牛传染性鼻气管炎病毒具有较高的敏感性，能够准确反映病毒的活性。

4. 实验中如何避免污染？

为避免污染，需注意以下几点：

• 所有实验器材在使用前需经过严格的消毒处理。
• 操作时应佩戴手套，并在无菌环境中进行。
• 实验过程中避免交叉污染，如不同样本的液体接触。

5. 中和滴度如何计算？

中和滴度是指能完全抑制病毒细胞病变效应的最低血清稀释倍数。具体计算方法如下：

• 将实验组与对照组的结果进行对比。
• 找到能使病毒完全被抑制的最高稀释倍数。
• 该稀释倍数即为中和滴度。

6. 如果实验结果不一致怎么办？

如果实验结果不一致，可能的原因包括：

• 样本质量不佳或保存不当。
• 实验操作过程中的误差。
• 细胞培养条件不适宜。

建议重新进行实验，并严格遵守操作规程，确保每一步骤都规范执行。

7. 微量血清中和试验的优势是什么？

微量血清中和试验的优势在于：

• 特异性高，能够准确检测牛传染性鼻气管炎病毒抗体。
• 灵敏度强，可以检测出较低浓度的抗体。
• 结果直观，通过观察细胞病变效应即可得出结论。

8. 实验中需要注意哪些安全事项？

在进行微量血清中和试验时，需注意以下安全事项：

• 病毒悬液具有生物危险性，操作时需在生物安全柜内进行。
• 实验废弃物需按生物废物处理规定妥善处置。
• 实验人员需穿戴防护服、手套和口罩。