TCACM 1326.4-2019 益智种子超低温保存技术规程

摘要：本文件规定了益智种子超低温保存的术语和定义、保存流程、技术要求、操作规范及质量控制。本文件适用于益智种子的超低温保存及相关科研工作。
Title：Technical Regulations for Ultra-low Temperature Preservation of Alpinia Seeds
中国标准分类号：B 71
国际标准分类号：65.020.01

益智种子超低温保存技术是保障种质资源长期安全保存的重要手段。在TCACM 1326.4-2019《益智种子超低温保存技术规程》中，与旧版相比，关于复苏操作这一环节有较为显著的变化。复苏是将经过超低温处理后的益智种子恢复至常温的过程，直接影响种子存活率和后续萌发能力。

新版标准明确了复苏的具体步骤：首先将装有种子的冻存管从液氮罐中快速取出，立即放入38℃±0.5℃的水浴锅中进行快速解冻，整个过程控制在8秒到10秒之间。这样做可以避免因温度变化过慢导致细胞内外冰晶形成对细胞结构造成破坏。

实际应用时需要注意以下几点：一是确保水浴锅温度恒定且准确，过高或过低都会影响复苏效果；二是动作要迅速，尽量缩短种子暴露在室温下的时间；三是复苏后应尽快进行预处理，比如用无菌水清洗表面残留物，并转入适宜的培养基中观察反应情况。通过严格遵循这些规范，能够有效提高益智种子复苏的成功率，为后续研究和种植提供可靠保障。