TZNZ 287-2024 瓜菜作物中抗生素抗性基因检测 高通量 荧光定量 PCR 法

本文将聚焦于《TZNZ 287-2024 瓜菜作物中抗生素抗性基因检测 高通量 荧光定量PCR法》中关于“高通量荧光定量PCR检测流程”的关键变化，特别是与旧版相比新增的样本前处理要求及其实际操作要点。

在新版标准中，明确规定了在进行荧光定量PCR检测之前，需对瓜菜作物样本进行两次离心处理：首先以10,000×g离心10分钟去除大颗粒杂质；然后以15,000×g离心5分钟进一步纯化核酸溶液。这一改变旨在提高检测灵敏度和准确性。具体操作时，技术人员应确保样本充分混匀后立即进行第一次离心，避免长时间暴露于室温导致核酸降解。第二次离心前还需仔细检查上清液是否清澈透明，必要时可重复离心步骤直至获得纯净的核酸溶液。

此外，新版标准还强调了使用无RNA酶和DNA酶的一次性耗材的重要性，并要求实验环境严格控制污染风险。例如，在整个样本处理过程中，所有接触样本的操作均应在超净工作台内完成，且每次更换手套后需重新消毒工作台面。这些措施能够有效减少外源性核酸污染，从而保障检测结果的真实可靠。通过严格执行上述样本前处理流程，可以显著提升抗性基因检测效率及数据质量。