资源简介
摘要:本文件规定了土壤中抗生素抗性基因检测的高通量荧光定量PCR法的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、数据分析及结果报告。本文件适用于土壤中多种抗生素抗性基因的定性和定量检测。
Title:Detection of Antibiotic Resistance Genes in Soil - High-throughput Fluorescence Quantitative PCR Method
中国标准分类号:Z72
国际标准分类号:13.060.99
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拓展解读
本文以《TZNZ 286-2024 土壤中抗生素抗性基因检测 高通量荧光定量PCR法》为例,重点解析该标准中新旧版本间的关键差异——即样品前处理步骤的优化。这一改进直接影响了检测结果的准确性与效率。
在旧版标准(假设为TZNZ 286-2019)中,样品前处理主要依赖于传统的物理化学方法,如离心、过滤等手段来去除土壤颗粒和杂质。然而,在实际操作过程中发现,这种方法不仅耗时较长,而且容易导致目标DNA丢失,影响最终检测精度。
新版标准通过引入更先进的超声波辅助提取技术替代传统方法,在保持原有效果的基础上显著缩短了处理时间,并提高了目标物质回收率。具体应用时,首先将采集到的土壤样本按照规定比例加入缓冲液并充分混合均匀后置于超声波清洗仪内进行处理。此过程不仅能有效破碎细胞壁释放出内部核酸,同时还能促进杂质沉淀分离,从而达到净化样品的目的。
此外,在执行上述操作时还需注意以下几点:
1. 超声功率及时间需根据样品特性调整至最佳状态;
2. 缓冲液成分应严格遵循标准要求配制;
3. 整个操作应在无菌条件下完成以避免污染。
通过以上改进措施,新版标准不仅提升了实验效率,还增强了数据可靠性,为科研工作者提供了更加精准可靠的检测工具。这充分体现了标准化工作与时俱进、不断完善的特点,对于推动相关领域科技进步具有重要意义。