DB22T 3680-2024 实验用水貂 胚胎采集及移植技术规程

《实验用水貂胚胎采集及移植技术规程》（DB22/T 3680-2024）是一项专门针对实验用水貂胚胎操作的技术规范。这项标准旨在规范水貂胚胎的采集、处理、保存以及移植等环节，确保实验结果的准确性和可靠性。

一、适用范围

该标准适用于科研和教学中使用实验水貂进行胚胎操作的相关活动。这包括但不限于繁殖研究、遗传学研究等领域。

二、术语和定义

1. 胚胎采集：从母体子宫或输卵管内取出正在发育中的胚胎的过程。

2. 胚胎移植：将采集到的胚胎植入受体母貂子宫内的过程。

3. 冷冻保存：通过特定方法降低胚胎温度以达到长期保存的目的。

三、胚胎采集

# 采集时间

胚胎应在受精后第7天至第10天之间采集，此时胚胎处于桑椹胚阶段，适合后续处理。

# 采集工具与方法

- 使用无菌手术刀片或其他专业工具小心切开母貂腹部皮肤及腹膜。

- 轻轻剥离子宫角直至可见胚胎所在位置。

- 使用无菌注射器吸取胚胎周围的液体并分离出胚胎。

四、胚胎处理

# 清洗

- 将采集到的胚胎放入预冷的PBS溶液中漂洗三次，每次5分钟。

- 每次漂洗后更换新的PBS溶液。

# 分级

根据胚胎大小、形状及透明度对胚胎进行分级：

- A级：完全正常的胚胎；

- B级：轻微异常但仍可接受；

- C级：严重异常无法用于实验。

五、胚胎保存

# 冷冻保存步骤

1. 首先将筛选好的胚胎置于含有10%甘油的PBS溶液中平衡10分钟；

2. 然后转移至含15%甘油的PBS溶液中继续平衡10分钟；

3. 最后放入含20%甘油的PBS溶液中平衡10分钟；

4. 使用程序降温仪逐步降低温度至-80℃；

5. 最终移入液氮罐中长期保存。

六、胚胎移植

# 受体选择

选择健康状况良好、体型适中的成年雌性水貂作为受体。

# 移植前准备

- 对受体进行常规体检，确保其身体健康；

- 提前一周开始给予黄体酮类药物促进子宫内膜增厚。

# 移植过程

- 在无菌条件下打开受体腹部，暴露子宫；

- 使用显微镜辅助将胚胎精确植入子宫腔内；

- 缝合切口，并观察恢复情况。

七、注意事项

1. 所有操作均需在符合GMP标准的实验室环境中完成；

2. 操作人员必须经过专业培训，熟悉整个流程；

3. 应定期检查设备运行状态，保证实验顺利进行。

以上是《实验用水貂胚胎采集及移植技术规程》（DB22/T 3680-2024）中一些关键内容的详细解读。遵循这些规定不仅能够提高实验成功率，还能有效保护动物福利，推动相关科学研究的发展。