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摘要:本文件规定了家畜光滑型布鲁氏菌抗体荧光偏振检测的原理、试剂与材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果计算与表达、精密度及质量控制。本文件适用于牛、羊等家畜布鲁氏菌抗体的检测。
Title:Fluorescence Polarization Detection Method for Smooth Brucella Antibodies in Livestock
中国标准分类号:B 46
国际标准分类号:67.120
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拓展解读
DB62/T 4966-2024《家畜光滑型布鲁氏菌抗体荧光偏振检测方法》是一项专门用于检测家畜布鲁氏菌病抗体的省级地方标准。以下将对标准中的关键条款进行详细解读。
1. 范围:本标准规定了采用荧光偏振免疫测定技术检测家畜血清或乳中光滑型布鲁氏菌抗体的方法,适用于牛、羊等家畜。
2. 规范性引用文件:该标准引用了GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法等相关国家标准,确保实验用水的质量符合要求。
3. 原理:基于抗原与抗体特异性结合原理,通过测量荧光偏振度来判断样品中是否存在特定抗体。当抗体存在时,荧光分子旋转速度减慢,导致偏振度增加。
4. 试剂与材料:包括缓冲液、阳性对照品、阴性对照品、标准曲线溶液等。所有试剂需在有效期内使用,并按照说明书配制。
5. 仪器设备:要求使用具备自动进样功能且能精确控制温度的荧光偏振仪,同时配备相应的软件系统用于数据分析处理。
6. 样品采集与保存:采集新鲜血液或乳汁样本后立即分离血清或乳清,并置于-20℃条件下冷冻保存直至检测前。
7. 实验步骤:
- 准备工作区环境清洁无污染;
- 按照操作手册正确设置仪器参数;
- 加入适量样品及相应试剂于反应杯内混合均匀;
- 将反应杯放置于仪器指定位置开始测定;
- 记录结果并绘制标准曲线。
8. 结果计算与判定:利用标准曲线公式计算出待测样品中抗体浓度值,若超出临界阈值则判定为阳性反应。
9. 注意事项:强调实验过程中严格遵守生物安全防护措施,避免交叉感染风险;定期校准仪器保证测量准确性;妥善处置废弃物防止环境污染。
以上是对DB62/T 4966-2024标准中重要内容的深入解析,希望对你理解和应用此标准有所帮助。