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摘要:本文件规定了大花绣球组织培养快繁育苗的技术要求,包括材料选择、消毒处理、培养基配方、培养条件、继代增殖、生根诱导、炼苗移栽及管理措施。本文件适用于大花绣球的组织培养快繁育苗生产及相关研究。
Title:Technical Regulations for Rapid Propagation of Hydrangea macrophylla by Tissue Culture
中国标准分类号:B 31
国际标准分类号:65.020.20
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拓展解读
DB43/T 3075-2024《大花绣球组织培养快繁育苗技术规程》是一项湖南省地方标准,为大花绣球的组织培养提供了系统的操作指南。以下将从关键条款出发,深入解析该标准的重要内容。
一、材料准备与消毒处理
标准中明确指出,外植体应选择无病虫害且健壮的大花绣球植株的嫩茎或腋芽作为起始材料。在接种前需对材料进行严格的表面消毒处理,具体步骤如下:先用70%-75%的酒精浸泡30秒至1分钟,随后用质量分数为0.1%-0.2%的氯化汞溶液消毒8-10分钟,并立即用无菌水冲洗至少5次。此过程旨在最大限度地减少微生物污染风险,确保后续培养的成功率。
二、培养基配方及条件设定
对于初代培养阶段,推荐使用MS基础培养基添加6-BA 0.5mg/L和NAA 0.1mg/L作为激素组合,蔗糖浓度为3%,琼脂浓度为6-7g/L,pH值调整至5.8。培养温度控制在23℃±2℃之间,光照强度维持在2000-2500lx,每日光照时长为12小时。这些参数的选择基于大量试验数据,能够有效促进芽点分化与生长。
三、继代增殖策略
当幼苗长至2-3cm高时即可进行第一次继代转接。此时可选用相同的MS培养基但适当提高6-BA至0.8mg/L以加快增殖速度。每次转接密度保持在每瓶不超过5个苗,这样可以保证每个个体都有足够的养分供应。随着代数增加,逐渐降低6-BA浓度直至停止添加,同时补充IAA促进根系发育。
四、生根诱导与炼苗移栽
当植株高度达到4-5cm并已形成良好侧枝时转入生根培养阶段。此时改用1/2MS+IBA 0.5mg/L+活性炭0.5g/L的培养基,保持上述相同的环境条件。大约两周后即可观察到明显根系生成。之后逐步减少培养基湿度,并在自然光下适应7-10天完成炼苗过程,最后将健康苗移植到经过消毒处理的基质中继续养护。
五、注意事项
在整个培养过程中必须严格遵守无菌操作规程,定期检查培养室内的温湿度及光照情况,及时更换过期或污染的培养物。此外还需注意防止机械损伤以及避免过度拥挤导致营养竞争等问题的发生。
以上是对DB43/T 3075-2024中部分核心条款的深度解读,希望对你理解和应用这项标准有所帮助。