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摘要:本文件规定了地方猪品种纯度基因组鉴定的术语和定义、样品采集与处理、DNA提取、基因分型方法、数据分析及结果判定。本文件适用于湖南省地方猪品种的纯度鉴定及相关研究工作。
Title:Technical Regulations for Genomic Identification of Native Pig Breed Purity in Hunan Province
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB43/T 3045-2024《地方猪品种纯度基因组鉴定技术规程》是一项重要的地方标准,旨在规范湖南地区地方猪品种的纯度鉴定工作。以下是对该标准中一些关键条文的详细解读:
1. 适用范围
标准适用于湖南省内地方猪品种如宁乡猪、大围子猪和湘西黑猪等的纯度鉴定。这明确了标准的应用领域,确保了鉴定工作的针对性和专业性。
2. 术语和定义
- 地方猪品种:指在特定地理区域内长期形成并具有独特遗传特性的猪种。
- 基因组鉴定:通过检测个体DNA序列差异来判断其是否属于某一特定品种的方法。这一定义为后续的技术操作提供了理论基础。
3. 样品采集与保存
标准要求从耳缘或尾尖部位取样,并使用95%酒精对样品进行初步处理后置于-20℃条件下保存。此规定有助于保证样本的质量,避免因不当保存导致结果偏差。
4. DNA提取
提取过程需遵循严格的操作流程,确保DNA浓度不低于50ng/μL且OD260/280值介于1.8至2.0之间。高质量的DNA是准确检测的前提条件。
5. 引物设计原则
引物应覆盖目标品种特有的SNP位点,并且扩增片段长度控制在100bp到300bp范围内。合理的设计能够提高检测效率及准确性。
6. 数据分析方法
使用荧光定量PCR仪进行检测后,根据Ct值计算每个样本相对于参考品系的比例。当比例达到预设阈值时即可判定为纯种个体。这种方法简单直观,便于实际操作。
7. 质量控制措施
每批次实验均需设置阳性对照组、阴性对照组以及空白对照组以验证体系有效性。此外还应该定期校准仪器设备,确保数据可靠性。
8. 报告出具要求
最终报告应当包含被测个体基本信息、检测结果以及结论等内容。对于不符合要求的情况还需提出改进建议或者重新采样再测。
以上内容基于DB43/T 3045-2024标准中的核心条款进行了深入剖析,希望能帮助相关从业者更好地理解和执行这项技术规程。