TCADERM 3057-2024 快速荧光灶抑制试验检测抗狂犬病病毒中和抗体的临床应用

快速荧光灶抑制试验（RFFIT）是检测人和动物血清中抗狂犬病病毒中和抗体的重要方法。在最新发布的TCADERM 3057-2024《快速荧光灶抑制试验检测抗狂犬病病毒中和抗体技术规范》中，相较于旧版标准，对样本处理和结果判定部分进行了显著优化。

以样本稀释液的选择为例，新版标准明确要求使用含有0.1%吐温-20的PBS作为样本稀释液。这一改动基于大量实验数据表明，吐温-20能够有效减少非特异性结合，提高检测灵敏度。具体操作时，首先将待测血清样本按1:2的比例加入稀释液中进行初次稀释，然后按照1:2递增倍比稀释至8个浓度梯度。每份样本需同时制备阴性和阳性对照。值得注意的是，在整个稀释过程中，所有操作均应在4℃条件下完成，并且每次移液后立即混匀，确保样本与稀释液充分结合。

此外，新版标准还强调了孵育时间的重要性。样本与病毒混合后的孵育时间应严格控制在60±5分钟之间。过短的孵育时间可能导致病毒未能充分与抗体结合，影响检测准确性；而时间过长则可能引起假阳性结果。因此，在实际操作中，必须严格按照设备运行参数设定孵育时长，并通过定时器精确计时。

总之，TCADERM 3057-2024通过对样本稀释液选择、稀释步骤及孵育时间等关键环节的细化规定，进一步提高了RFFIT检测抗狂犬病病毒中和抗体的准确性和可靠性，为临床诊断提供了更科学的技术支持。