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摘要:本文件规定了青稞育成品种DNA指纹图谱鉴别的术语和定义、检测方法、数据处理与分析、判定依据和技术要求。本文件适用于青稞育成品种的真实性鉴定和品种管理。
Title:Identification Specification for DNA Fingerprint of Barley Cultivated Varieties
中国标准分类号:B 04
国际标准分类号:65.020.01
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拓展解读
《DB63T 2291-2024 青稞育成品种DNA指纹图谱鉴别规范》是青海省地方标准,旨在通过DNA指纹技术对青稞育成品种进行科学、准确的鉴别。以下是对该标准中一些关键条款的详细解读。
样品采集与保存
标准规定了样品采集的时间和方法,要求在青稞植株生长的关键时期采集叶片组织作为样本。同时强调了样品保存的温度和时间限制,确保样本的新鲜度和完整性,这对于后续DNA提取至关重要。
DNA提取与纯化
本部分明确了DNA提取的方法选择,推荐使用CTAB法或硅胶膜柱法,并对提取过程中的关键参数如缓冲液配方、离心速度等做出了具体指导。此外还提到如何评估DNA的质量和浓度,以保证后续实验的成功率。
PCR扩增体系建立
PCR反应体系的构建直接影响到结果的准确性。标准指出应根据目标序列设计特异性引物,并详细描述了每种成分的比例以及最佳退火温度的选择原则。同时建议采用多重PCR技术来提高检测效率。
数据分析与结果判定
数据分析阶段需要借助专业的软件工具来进行比对分析。标准特别强调了参考数据库的重要性,只有当待测样本与已知品种之间的相似度达到一定阈值时才能做出最终判断。此外还提供了几种常见的统计学方法用于衡量差异程度。
质量控制措施
为了保证整个流程的一致性和可靠性,标准提出了多项质量控制措施。包括但不限于设置阳性对照、阴性对照以及空白对照;定期校准仪器设备;记录每次操作的日志信息等内容。
以上就是对《DB63T 2291-2024 青稞育成品种DNA指纹图谱鉴别规范》中若干核心内容所做的深入解析。遵循这些规定不仅能够有效提升鉴定工作的精确度,而且有助于促进青稞种质资源保护工作的开展。