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摘要:本文件规定了两系杂交水稻品种纯度的SSR(简单序列重复)分子标记鉴定方法,包括样品采集、DNA提取、PCR扩增、电泳检测及结果分析等内容。本文件适用于两系杂交水稻品种纯度的检测与评价。
Title:Identification Method of Purity for Two-line Hybrid Rice Varieties by SSR
中国标准分类号:B 31
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB4201/T 520-2017《两系杂交水稻品种纯度SSR鉴定方法》是湖北省武汉市农业科学院等单位共同制定的一项地方标准。该标准规定了利用简单重复序列(SSR)分子标记技术对两系杂交水稻品种纯度进行检测的方法,适用于两系杂交水稻种子的纯度鉴定。
标准核心内容解析
适用范围
本标准适用于两系杂交水稻种子纯度的鉴定。明确了标准的应用领域,即专门针对两系杂交水稻种子,而非其他类型的农作物或杂交稻类型。
术语和定义
- 两系杂交水稻:指具有光温敏核不育特性的水稻品种,其不育系在高温长日照条件下表现为雄性不育,在低温短日照条件下可恢复为可育。
- 简单重复序列(SSR):也称微卫星DNA,是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA片段,由2至6个碱基组成的重复单位构成。
原理
SSR标记技术基于两系杂交水稻不同品种间SSR位点的多态性差异。通过扩增目标DNA片段并电泳分离,比较待测样品与已知标准样品之间的带型差异来判断品种纯度。
材料与仪器
所需材料包括待测样品、标准样品、DNA提取试剂盒等。仪器设备则需要PCR仪、电泳系统及凝胶成像系统等。
样品采集与处理
从待测种子中随机抽取足够数量的种子作为供试样本,并按照规定的程序提取高质量的基因组DNA。
实验步骤
1. 设计特异性引物:根据已知的两系杂交水稻品种信息设计SSR引物。
2. PCR扩增:使用设计好的引物对提取的DNA进行扩增反应。
3. 产物检测:将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳分析。
4. 数据记录与分析:观察并记录电泳图谱,比对待测样品与标准样品之间的带型一致性。
结果判定
若待测样品与标准样品之间存在显著差异,则认为该样品不符合该品种的标准;反之,则视为合格。具体差异程度需依据实际工作经验和技术水平确定。
注意事项
- 在整个操作过程中应严格遵守无菌操作规程,避免污染。
- 对于新引进的品种,建议先建立相应的标准曲线后再进行正式检测。
- 定期校准仪器设备,确保测量结果准确可靠。
以上就是DB4201/T 520-2017《两系杂交水稻品种纯度SSR鉴定方法》的主要内容及其关键点解读。这项标准为提高两系杂交水稻种子的质量控制提供了科学依据和技术支持。