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资源简介
摘要:本文件规定了甘薯病毒分子检测的术语和定义、样品采集与处理、检测方法及结果判定。本文件适用于甘薯病毒的分子检测及相关研究。
Title:Technical Specification for Molecular Detection of Sweet Potato Viruses
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020.01 -
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拓展解读
《DB4415/T 24-2023 甘薯病毒分子检测技术规程》是广东省地方标准,于2023年发布实施。该标准规定了甘薯病毒分子检测的技术要求和操作规范,对保障甘薯种苗质量和生产安全具有重要意义。以下将选取部分关键条文进行详细解读。
**一、适用范围**
标准适用于广东省范围内甘薯病毒的分子检测。这明确了标准的应用地域和对象,确保检测方法在特定区域内的适用性和权威性。
**二、术语和定义**
标准中对“甘薯病毒”、“分子检测”等术语进行了明确界定。例如,“甘薯病毒”是指侵染甘薯植株并导致病害的病毒类微生物。准确的术语定义有助于统一行业内对概念的理解,避免因表述不清而引发的误解。
**三、样品采集与处理**
标准要求样品应在无污染环境下采集,确保样本的代表性和真实性。具体包括:采样部位应选择叶片或茎尖等富含病毒的部分;采样工具需经严格消毒以防止交叉污染;样本应及时送检或妥善保存以防降解。
**四、核酸提取**
核酸提取是分子检测的基础步骤。标准规定使用商业化试剂盒或自制试剂进行提取,强调操作过程中要保持低温环境,避免核酸降解。同时,还应设立阴性和阳性对照组,以验证提取过程的有效性。
**五、PCR扩增条件**
聚合酶链式反应(PCR)是检测病毒核酸的关键技术。标准详细列出了引物序列、退火温度、循环次数等参数。如推荐使用特异性较高的引物设计原则,设定适当的退火温度以提高扩增效率,设置合理的循环次数避免非特异性扩增。
**六、结果判定**
结果判定依据扩增产物的大小及特异性来确定。标准指出,若扩增出与预期大小相符且具有特异性的条带,则判定为阳性;反之则为阴性。此外,还需结合对照组结果综合分析,排除假阳性和假阴性可能。
**七、质量控制**
为保证检测结果的可靠性,标准提出了全面的质量控制措施。包括定期校准仪器设备、定期更换耗材、建立完整的记录档案等。这些措施能够有效监控整个检测流程,确保数据的真实性和准确性。
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最后更新时间 2025-06-03