DB65T 4671-2023 土壤中棉花黄萎病菌检测与分离鉴定规程

摘要：本文件规定了土壤中棉花黄萎病菌的检测与分离鉴定的术语和定义、样品采集、样品处理、病原菌分离、病原菌鉴定及结果报告。本文件适用于新疆地区土壤中棉花黄萎病菌的检测与分离鉴定。
Title：Detection and Isolation Identification Procedure for Verticillium dahliae in Soil
中国标准分类号：B 61
国际标准分类号：65.020.20

DB65/T 4671-2023《土壤中棉花黄萎病菌检测与分离鉴定规程》是新疆维吾尔自治区发布的关于棉花黄萎病菌检测的重要地方标准。以下选取了几个关键条款进行详细解读。

首先是样品采集部分。标准要求在棉花生长的关键时期进行采样，通常为花铃期和吐絮期。采样点应选择在病株周围30-50厘米范围内，取土深度为20-30厘米。这一规定是为了确保能够采集到含有病原菌的典型土壤样本。

其次是病原菌分离部分。标准推荐使用组织分离法和稀释平板法。组织分离法需要将疑似感染的棉花根茎组织切成小块后接种于PDA培养基上，在25℃条件下培养7天观察菌落特征。稀释平板法则需将土壤样品制成悬液后涂布于培养基表面，同样在相同条件下培养并计数菌落数量。这两种方法各有优势，可以互相验证结果。

再来看鉴定部分。标准指出，通过显微镜观察菌丝形态、分生孢子梗及分生孢子的特征来进行初步鉴定。进一步确证可采用PCR扩增特异性引物的方法检测Vd病菌DNA。此外，还强调了田间症状观察的重要性，如叶片出现黄色或褐色斑块、叶脉变黑等都是重要的参考依据。

最后是报告编写的要求。标准要求记录详细的采样信息包括地点、时间、天气状况等，以及实验室操作过程中的关键参数。检测结果应当明确给出阳性或阴性的结论，并附上必要的图片资料作为佐证。

这些内容构成了整个检测流程的核心框架，对于准确判断土壤中是否存在棉花黄萎病菌具有重要意义。

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