DB65T 4666-2023 牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法

摘要：本文件规定了牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验的鉴别诊断方法，包括试验原理、试剂与材料、仪器设备、操作步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于牛羊布鲁氏菌感染的实验室检测与诊断。
Title：Identification Method of Agar Diffusion Test for Natural Semi-hapten of Brucella in Cattle and Sheep - DB65T 4666-2023
中国标准分类号：B 46
国际标准分类号：11.220

DB65/T 4666-2023《牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法》是一项新疆维吾尔自治区地方标准，主要用于牛羊布鲁氏菌病的诊断。这项标准规定了使用琼脂扩散法检测牛羊布鲁氏菌抗体的方法，具有重要的科学价值和实际应用意义。

### 标准的重要条文解读

**1. 范围**

该标准适用于牛羊布鲁氏菌病的血清学诊断。通过琼脂扩散试验可以有效区分不同种属的布鲁氏菌感染，为动物疫病防控提供技术支持。

**2. 规范性引用文件**

标准中引用了GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法等基础规范，确保实验用水的质量符合要求，从而保证试验结果的准确性。

**3. 试剂与材料**

标准对所需试剂如琼脂板、溴化乙锭、染色液等提出了具体要求，并明确指出应采用无菌操作以防止污染。此外，还强调了半抗原的制备需严格按照规定流程执行，确保其活性稳定。

**4. 实验步骤**

包括样品处理、凝胶制备、加样点样、电泳及观察结果等多个环节。其中特别指出，在点样时应注意控制样本量，避免过量导致扩散不良；电泳结束后要充分干燥后再进行染色，这样可以获得清晰的结果。

**5. 结果判定**

根据标准规定，阳性反应表现为明显的沉淀线形成，而阴性则没有明显变化。同时要求至少设置两个已知阳性对照和一个阴性对照来验证实验的有效性。

**6. 注意事项**

强调了整个过程中必须保持严格的卫生条件，所有器材均需经过彻底清洗消毒后方可再次使用。此外还提醒操作人员穿戴适当的防护装备，以防接触有害物质造成健康损害。

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