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摘要:本文件规定了犬和猫细小病毒的PCR检测方法,包括样品采集、核酸提取、PCR扩增及结果分析等内容。本文件适用于犬和猫细小病毒感染的实验室诊断及相关研究工作。
Title:Detection Method of Canine and Feline Parvovirus by PCR
中国标准分类号:
国际标准分类号:11.100.99
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拓展解读
TCVMA 178-2024《犬和猫细小病毒PCR检测方法》相较于旧版标准,在样本处理和扩增体系优化上做出了显著改进。本文重点解析新版标准中关于核酸提取步骤的变化及其实际应用。
在旧版标准中,样本预处理主要依赖于简单的离心沉淀法去除杂质,这种做法对微量病毒核酸的回收率较低,影响了后续检测灵敏度。而TCVMA 178-2024引入了磁珠法核酸提取技术,该方法通过特异性吸附剂与目标核酸结合,再经磁场分离,能够更高效地从复杂样本中纯化出高质量DNA。具体操作时,首先将采集的粪便或呕吐物样本加入裂解液中充分混匀并静置一段时间以破坏细胞结构释放核酸,接着加入结合液使核酸与磁珠牢固结合,随后经过多次洗涤去除蛋白和其他杂质,最后用洗脱液将核酸从磁珠表面洗脱下来用于PCR反应。
这一改变带来的好处显而易见:一方面提高了检测下限,使得低浓度感染也能被准确检出;另一方面减少了试剂用量和操作时间,提升了工作效率。例如,在临床诊断过程中,当怀疑宠物患有细小病毒感染时,及时采用磁珠法提取核酸可以缩短等待结果的时间,为治疗争取宝贵机会。因此,在使用TCVMA 178-2024进行犬和猫细小病毒PCR检测时,应严格按照新版标准中的核酸提取流程执行,确保获得可靠的结果。