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摘要:本文件规定了利用DNA条形码技术对水质中底栖动物进行鉴定的方法,包括样品采集、DNA提取、扩增、测序及数据分析等步骤。本文件适用于基于DNA条形码技术的水质底栖动物种类鉴定和生态评估。
Title:Water Quality - Identification of Benthic Animals - DNA Barcode Method
中国标准分类号:Z50
国际标准分类号:13.060.40
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拓展解读
DB21/T 3794-2023《水质 底栖动物鉴定 DNA条形码法》是辽宁省地方标准,于2023年实施。该标准规定了利用DNA条形码技术对水体中底栖动物进行分类鉴定的方法,适用于河流、湖泊等水体生态环境监测。
标准中最重要的部分是样品采集与处理。要求在不同生境选择代表性采样点,使用网具收集底栖动物,现场固定并记录环境参数。样品需低温保存并在规定时间内完成DNA提取。
DNA条形码区域的选择非常关键。标准推荐使用COI基因作为主要条形码位点,同时可补充18S rRNA等辅助位点。要求扩增片段长度一般为650bp左右,确保包含足够的种间变异信息。
实验操作部分强调质量控制。包括设置空白对照和阳性对照,采用多重PCR降低污染风险。测序数据需通过序列比对库BLAST进行物种匹配,并结合形态学特征综合判断。
结果报告部分要求详细记录样本信息、检测方法、比对结果及鉴定结论。对于未明确物种需提供最高相似度匹配情况。还应给出不确定性的说明和改进建议。
标准最后附录提供了常见底栖动物参考序列数据库的构建方法,以及数据分析软件使用指南。这为实际操作提供了详实的技术支持。
总之,该标准从样品采集到数据分析建立了完整的操作流程,为准确评估水体生态健康状况提供了科学依据。