DB65T 4640-2022 胡杨雌雄株分子鉴定技术规程

摘要：本文件规定了胡杨雌雄株分子鉴定的术语和定义、试验材料、主要仪器设备与试剂耗材、DNA提取、PCR扩增、电泳检测及结果分析。本文件适用于胡杨雌雄株的分子鉴定。
Title：Technical Regulations for Molecular Identification of Populus euphratica Male and Female Plants
中国标准分类号：B 46
国际标准分类号：65.020

《DB65/T 4640-2022胡杨雌雄株分子鉴定技术规程》是新疆维吾尔自治区发布的关于胡杨雌雄株分子鉴定的技术规范。该标准适用于胡杨林区中雌雄株的快速、准确鉴别，对于胡杨资源保护和利用具有重要意义。

### 关键条文解读

**1. 样品采集**

标准规定样品应从健康生长的胡杨树上采集新鲜叶片作为DNA提取材料。要求每个样本需标注清楚采集地点、时间及树种信息。这一条强调了样本来源的真实性和完整性，确保后续实验结果的有效性。

**2. DNA提取**

采用CTAB法进行DNA提取，并明确指出提取过程中需严格控制温度和时间参数，以保证DNA质量。高质量的DNA是成功开展分子标记检测的前提条件。

**3. 分子标记选择与扩增**

推荐使用SSR（简单重复序列）标记对胡杨雌雄株进行区分。具体操作时，需根据引物设计原则优化反应体系，包括模板DNA浓度、引物浓度等。通过PCR扩增后，利用毛细管电泳技术分离产物并记录峰图数据。

**4. 数据分析**

将获得的电泳图谱导入专业软件进行处理，计算各等位基因片段大小。通过比较雌雄株间特定标记位点的差异来判断性别。标准特别指出，在缺乏参考序列的情况下，可参照已发表文献中的相关数据辅助判断。

**5. 结果验证**

为确保鉴定结果可靠性，建议采用至少两种独立的方法交叉验证。例如结合形态学特征或组织化学方法进一步确认性别鉴定准确性。

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