DB22T 3455-2023 分蘖洋葱中洋葱黄矮病毒检测 实时荧光PCR法

DB22/T 3455-2023《分蘖洋葱中洋葱黄矮病毒检测 实时荧光PCR法》是吉林省发布的关于植物病害检测的重要地方标准。以下选取几个关键条文进行深入解读。

标准中的“5.1 样品采集”规定了样品应从田间随机抽取，每个地块不少于5个点，每个点采集10株植株。这一要求确保了样本的代表性，避免因采样不均导致检测结果失真。

在“6.2 提取液制备”部分强调使用专门的核酸提取试剂盒，按照说明书操作。这一步骤至关重要，因为提取到高质量的RNA直接影响后续PCR反应的灵敏度和特异性。

标准明确指出“7.1.2 扩增体系”的组成：2×Premix Taq酶、正向引物、反向引物、ROX染料及模板RNA。其中引物设计需覆盖洋葱黄矮病毒基因组特定区域，确保扩增产物具有高度特异性。

“8 结果判定”部分规定Ct值≤35为阳性，Ct值>35且曲线无明显扩增峰为阴性。当Ct值介于35与38之间时需重复实验，若重复后仍在此范围内则判为可疑，建议进一步采用其他方法验证。

此外，“9 报告内容”要求包括样品信息、检测日期、试剂批号、仪器型号、扩增曲线图等详细信息。这些资料对于结果追溯和质量控制非常必要。

该标准还特别提到“10 注意事项”，提醒操作人员注意实验室环境清洁、试剂有效期以及废弃物处理等问题，以保证检测过程的安全性和可靠性。

通过以上解读可以看出，DB22/T 3455-2023不仅提供了科学规范的操作流程，还对各个环节提出了严格要求，有助于提高分蘖洋葱中洋葱黄矮病毒检测的准确性和一致性。