TBPMA 30-2004 畜禽肉中食源性兴奋剂和孕激素的测定 液相色谱-串联质谱法

《TBPMA 30-2004标准中液相色谱-串联质谱法测定孕激素的关键应用解析》

TBPMA 30-2004标准中液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）是测定畜禽肉中食源性兴奋剂和孕激素的重要手段。本文以该标准中孕激素的测定为例，深入探讨其关键应用方法。

首先，在样品前处理环节，需采用固相萃取技术对样品进行净化。具体操作为：取5克均质后的样品，加入10毫升甲醇提取，经旋转蒸发浓缩至近干后，用乙腈定容至1毫升。随后，将此溶液通过C18固相萃取小柱，以甲醇-水（7:3，V/V）洗脱，收集洗脱液并浓缩至1毫升，供仪器分析使用。

其次，在仪器分析阶段，液相色谱条件设置至关重要。色谱柱选用C18反相柱（150毫米×2.1毫米，3微米），流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸），梯度洗脱程序为：0-5分钟，5%-95%乙腈；5-8分钟，95%乙腈；8-10分钟，恢复初始条件。流速设定为0.3毫升/分钟，进样量为10微升。

质谱检测器的参数调整同样不可忽视。电喷雾离子源（ESI）正离子模式下，毛细管电压设为3500伏，干燥气流量为10升/分钟，温度为350摄氏度，碰撞气压力为1.6巴。各目标化合物的母离子、子离子及碰撞能量需根据标准物质优化确定。

最后，在数据处理环节，应采用内标法定量。选择结构相近且性质稳定的孕激素类似物作为内标物，与待测样品同步处理和分析。通过外标法绘制标准曲线，确保定量结果的准确性。

通过以上步骤，可以有效实现畜禽肉中孕激素的精准测定，满足食品安全监管需求。这一方法不仅提高了检测效率，还显著提升了检测结果的可靠性。