TCVMA 216-2025 小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法

摘要：本文件规定了小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法的技术要求和操作步骤。 本文件适用于动物血清中针对小反刍兽疫病毒抗体的检测，用于疾病监测与免疫评估。
Title：Antibody Detection Method for Peste des Petits Ruminants Virus by Double Antigen Sandwich ELISA
中国标准分类号：B41
国际标准分类号：11.220

在小反刍兽疫病毒（Peste des Petits Ruminants Virus, PPV）的防控工作中，抗体检测是评估疫苗免疫效果和疫情监测的重要手段。TCVMA 216-2025《小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法》作为一项重要的行业标准，对检测流程、试剂选择、操作规范等方面提出了系统化的要求。本文将聚焦于新旧版本标准中关于“检测灵敏度与特异性”的差异，深入解读其变化原因及实际应用中的注意事项。

在TCVMA 216-2025发布之前，相关标准可能较为笼统地要求使用双抗原夹心法进行抗体检测，但对如何控制检测过程中的干扰因素、如何优化反应条件以提高灵敏度和特异性缺乏具体指导。而新版标准则明确指出，应通过调整包被抗原浓度、优化封闭剂种类、控制温育时间与温度等手段，提升检测体系的稳定性和重复性。

这一改进具有重要意义。首先，提高灵敏度有助于发现低滴度抗体，对于早期感染或免疫后抗体水平较低的个体具有更高的检出率；其次，增强特异性可减少非特异性结合带来的假阳性结果，从而提高检测结果的可靠性。

在实际操作中，检测人员需严格按照标准要求进行实验设计。例如，在包被阶段，建议采用梯度稀释法确定最佳抗原浓度，确保信号强度与抗体浓度呈线性关系；在封闭步骤中，推荐使用含有牛血清白蛋白（BSA）的封闭液，以减少非特异性结合；此外，温育时间和温度的控制也至关重要，通常建议在37℃下温育30分钟，避免过长或过短影响反应效率。

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