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摘要:本文件规定了甜叶菊组培快繁的技术要求、操作步骤、质量控制和管理措施。本文件适用于甜叶菊的组培快繁生产及质量管理。
Title:Technical Regulations for Rapid Propagation of Stevia by Tissue Culture
中国标准分类号:B 61
国际标准分类号:65.020
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拓展解读
DB34/T 4315-2022《甜叶菊组培快繁技术规程》是一项安徽省地方标准,旨在规范甜叶菊的组织培养和快速繁殖技术流程。以下是对该标准中一些关键条款的详细解读。
1. 茎段的选择与处理
标准中指出,用于组培的茎段应来自生长健壮、无病虫害的植株,且茎段长度应在2至3厘米之间。在处理过程中,要求将茎段用75%酒精消毒30秒后,再用0.1%升汞溶液浸泡10分钟,最后用无菌水冲洗5次以上。这一过程确保了外植体的无菌状态,为后续培养创造了良好的条件。
2. 培养基的配制
培养基的选择是影响组培成功与否的关键因素之一。标准推荐使用MS(Murashige and Skoog)基本培养基,并根据实验需求添加不同浓度的植物激素如6-BA(苄氨基嘌呤)和NAA(萘乙酸)。例如,在诱导愈伤组织时,通常采用6-BA 1.0 mg/L与NAA 0.2 mg/L的组合;而在生根阶段,则可降低6-BA浓度至0.5 mg/L,同时提高NAA至0.5 mg/L。此外,还强调了蔗糖作为碳源的重要性,一般添加量为3%左右,并调整pH值至5.8±0.2。
3. 温度与光照控制
为了促进甜叶菊苗的健康生长,标准建议保持培养室温度在25±2℃范围内,并提供每日12小时的光照时间,光照强度维持在2000至3000勒克斯之间。这样的环境设置有助于加快细胞分裂速度并促进光合作用的有效进行。
4. 移栽管理
当试管苗长到约5厘米高时即可考虑移栽。移栽前需先让幼苗适应外界环境,即逐步减少温室内的湿度直至接近自然条件。实际种植时应选择肥沃疏松、排水良好的土壤,并施加适量有机肥料以支持新植株的成长。
通过遵循上述规定,可以有效地实现甜叶菊的大规模高效繁殖,从而满足市场对这种具有较高药用价值作物的需求。