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资源简介
摘要：本文件规定了动物源性产品中牛源性成分检测的数字PCR方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品制备与处理、检测步骤、结果分析及表达等内容。本文件适用于动物源性产品中牛源性成分的定性和定量检测。
Title：Detection of Bovine Components in Animal-derived Products by Digital PCR
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：67.050 -
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拓展解读
在TZNZ 267-2024《动物源性产品中牛源性成分检测 数字PCR法》与旧版标准的对比中，有一项重要的改进是数字PCR技术参数的优化。以“数字PCR反应体系的构建”为例，新版标准明确了更精确的试剂配比和反应条件。
根据TZNZ 267-2024的规定，数字PCR反应体系应包括模板DNA、特异性引物、探针以及酶混合液等组分。其中，模板DNA的浓度需控制在10-50 ng/μL之间，引物终浓度为300 nM，探针终浓度为200 nM。同时，反应体系的总体积设定为20 μL，其中包括10 μL的2×反应缓冲液、各0.5 μL的上下游引物和探针、2 μL的模板DNA以及适量的酶混合液补足体积。
在实际操作过程中，首先将上述所有液体组分按照上述比例混合均匀，然后加入到数字PCR芯片的反应孔中。随后，将芯片放入数字PCR仪中进行热循环扩增。通常设置95℃预变性10分钟，接着进行40个循环的95℃变性15秒和60℃退火延伸60秒，最后在4℃下保存。
这种优化后的反应体系能够显著提高检测的灵敏度和特异性，确保在复杂样品基质中也能准确识别出牛源性成分。例如，在实际应用中，某实验室利用此方法对一批牛肉制品进行了检测，结果表明该方法可以有效区分出掺杂有少量其他动物源成分的产品，从而保障了食品安全。
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