DB23T 3312—2022 水质总大肠菌群、粪大肠菌群和细菌总数监测技术规范

DB23/T 3312—2022《水质 总大肠菌群 粪大肠菌群和细菌总数监测技术规范》是一项黑龙江省地方标准，旨在规范水中微生物指标的检测工作。以下选取几个关键条款进行详细解读。

5.1 样品采集

样品应在清洁容器中采集，采样瓶需经过灭菌处理。采样前应先用待测水样冲洗采样瓶至少三次。采样时避免手指直接接触瓶口及内壁，采集后的样品应在4℃条件下保存并在24小时内完成检验。

5.2 样品运输与保存

运输过程中要防止剧烈震动，避免阳光直射。如不能及时检测，可将样品置于0-4℃冷藏箱内保存，但不得超过24小时。若需长期保存，应加入保护剂并控制在-70℃以下冷冻。

6.2 总大肠菌群测定方法

采用多管发酵法。取1mL水样接种于9ml灭菌生理盐水中制备1:10稀释液。依次稀释至1:100、1:1000等系列稀释度。每个稀释度接种三管乳糖蛋白胨培养液，36±1℃培养48±2h后观察结果。

7.2 粪大肠菌群测定方法

同样使用多管发酵法。取1mL水样接种于9ml灭菌生理盐水中制备1:10稀释液。按照总大肠菌群测定相同步骤操作，在36±1℃培养24±2h后，挑取典型菌落进行革兰氏染色鉴定，确认为革兰氏阴性杆菌后再进行确认试验。

8.2 细菌总数测定方法

采用倾注平板计数法。取1mL水样注入无菌平皿中，加入已融化并冷却至46℃左右的营养琼脂培养基约15mL，混匀后凝固。36±1℃培养48±2h后计数菌落数。