DB15T 2593—2022 冰草组织培养技术规程

冰草是一种具有较高营养价值和适应性的牧草品种，其组织培养技术对于种质资源保存、快速繁殖及遗传改良具有重要意义。DB15/T 2593—2022《冰草组织培养技术规程》的发布为规范冰草组织培养提供了科学依据。以下选取规程中的几个关键条款进行详细解读。

一、外植体的选择与处理

规程指出，外植体应选择生长健壮、无病虫害的植株作为材料来源。具体而言，幼嫩茎尖或叶片是较为理想的外植体类型。在实际操作中，需将采集到的外植体置于70%酒精中消毒30秒后，再用0.1%升汞溶液浸泡10分钟，并用无菌水冲洗5次以上以确保彻底灭菌。这一过程不仅能够有效去除表面附着的微生物污染，还能最大限度地保留外植体的活性。

二、培养基配方与激素配比

培养基是影响冰草组织培养成功与否的关键因素之一。规程推荐使用MS基本培养基，并根据不同发育阶段调整植物激素浓度。例如，在诱导愈伤组织阶段，6-BA（苄氨基嘌呤）与NAA（萘乙酸）的比例通常设定为1:1至2:1之间；而在分化芽时，则可适当降低6-BA浓度同时增加GA3（赤霉素）含量以促进芽点形成。此外，蔗糖作为碳源一般控制在3%左右，琼脂凝固剂添加量为6-8g/L，pH值维持在5.8±0.2范围内。

三、光照与温度条件

适宜的环境条件对于冰草组织培养的成功同样至关重要。规程建议培养初期采用暗培养方式促使愈伤组织顺利生成，当观察到明显分化现象后再转入光照条件下继续培养。光照强度保持在2000-3000lux之间，每日光照时间为12小时。温度方面，整个培养过程均需控制在25±2℃范围内，过高或过低都会对细胞分裂和生长产生不利影响。

通过以上三个方面的详细介绍可以看出，《冰草组织培养技术规程》从外植体选择到培养基配置再到环境调控都给出了明确指导，这对于提高冰草组织培养的成功率具有重要作用。希望相关从业者能够严格按照规程执行，从而实现高效稳定的冰草种苗生产。