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资源简介
摘要:本文件规定了小反刍兽疫抗体间接ELISA检测的原理、试剂和材料、仪器设备、样品处理、检测步骤、结果判定及注意事项。本文件适用于小反刍兽疫抗体的检测与评估。
Title:Indirect ELISA Method for Detection of Peste des Petits Ruminants Antibodies
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:11.220 -
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拓展解读
小反刍兽疫抗体间接ELISA检测方法(DB65/T 4493-2022)是一项重要的农业行业标准,用于检测小反刍动物如山羊和绵羊体内针对小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)的抗体。以下将选取部分关键条文进行深入解读。
首先在试剂与材料部分,规定了所需的主要试剂包括抗原、酶标二抗以及底物溶液等。特别强调了抗原制备需使用符合要求的小反刍兽疫病毒株,确保其纯度和活性达到标准,并且酶标二抗应具有高度特异性以保证检测结果的准确性。
关于样品处理,标准明确指出采集血液样本后需要静置一段时间使血清自然析出,然后通过离心分离得到纯净的血清用于检测。同时对于不同种类的小反刍动物样本处理方式做了统一规范,比如采样量、保存条件等均需严格遵守。
实验操作步骤中,重点描述了加样过程及反应时间控制。要求每个样品设置平行对照组,并且在整个孵育过程中保持恒定温度和湿度环境。此外还特别提到终止液添加后需立即测定吸光值,以减少外界因素对结果的影响。
结果判定依据OD值比值来确定是否为阳性反应,当S/P值大于或等于临界值时判断为阳性。值得注意的是,该标准还给出了详细的计算公式及参考范围,便于实际操作人员准确判断结果。
最后,在质量控制方面,标准提出了定期使用质控品进行内部验证的要求,确保每次检测都能获得可靠的数据。并且建议实验室间开展能力验证活动,通过相互比对进一步提高检测水平。
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最后更新时间 2025-06-03