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摘要:本文件规定了猪A型塞内卡病毒分离鉴定的术语和定义、样品采集与处理、病毒分离方法、病毒鉴定方法及结果判定。本文件适用于猪A型塞内卡病毒的实验室检测与诊断。
Title:Technical Specification for Isolation and Identification of Porcine A-type Seneca Virus
中国标准分类号:B46
国际标准分类号:11.220
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拓展解读
DB51/T 2905-2022《猪A型塞内卡病毒分离鉴定技术规范》是一项专门针对猪A型塞内卡病毒(Seneca Valley Virus,SVV)的分离与鉴定提供标准化操作流程的技术规范。以下是对该标准中一些重要条文的详细解读:
样品采集与处理
标准指出,在进行病毒分离之前,应从疑似感染动物身上采集适当的样本。推荐使用鼻咽拭子、口腔拭子或病变部位组织作为检测材料。样本采集后需立即置于冰上运输至实验室,并在24小时内完成处理。如果不能及时处理,则需要将样本保存在-70℃以下环境中直至实验开始。
病毒分离
病毒分离部分强调了细胞培养的重要性。通常采用猪肾细胞系(PK-15)作为宿主细胞来进行病毒培养。首先将采集到的新鲜样本加入到含有生长液的细胞培养瓶中,然后放置于37°C、5% CO2条件下孵育。每隔24小时观察一次细胞状态,当出现明显的细胞病变效应(CPE)时即可认为成功分离到了目标病毒。
鉴定方法
对于分离得到的病毒株,标准提出了多种鉴定手段。其中包括但不限于PCR扩增特异性基因片段、免疫荧光试验以及电子显微镜观察等方法。特别是通过RT-qPCR对VP1基因区域进行扩增,可以有效确认是否为A型塞内卡病毒感染。
结果分析与报告
最后,在完成所有必要的检测程序之后,应对结果进行全面分析并形成书面报告。报告内容应当包括但不限于样品信息、使用的试剂耗材清单、检测步骤描述、最终结论及建议措施等内容。此外,还特别提到任何阳性结果都应及时上报给相关卫生部门以便采取进一步防控措施。
以上便是对DB51/T 2905-2022《猪A型塞内卡病毒分离鉴定技术规范》中几个关键环节的深入解析。遵循此标准有助于提高检测准确性和效率,从而更好地控制和预防由该病原体引起的疾病传播。