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摘要:本文件规定了尿液中多种有机酸的气相色谱-质谱联用测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、样品采集与制备、分析步骤、结果计算与表达、精密度、检出限和定量限。本文件适用于通过尿液样本中有机酸的检测,用于代谢性疾病的筛查、诊断及监测。
Title:Urinary Organic Acids Detection by Gas Chromatography-Mass Spectrometry
中国标准分类号:C46
国际标准分类号:11.080
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拓展解读
尿液有机酸检测是临床诊断遗传代谢病的重要手段之一。TCRHA 060-2024《尿液有机酸检测 气相色谱-质谱联用法》作为行业推荐性标准,对检测流程、仪器参数、样品处理等进行了规范。本文聚焦于新旧版本标准中样品前处理方法的变化,对其应用细节进行深入解析。
在TCRHA 060-2019版本中,尿液样品预处理采用的是简单的稀释法,即将尿样直接加入内标后稀释至一定体积用于进样分析。然而,在2024年发布的最新版本中,增加了固相萃取(SPE)技术作为可选的样品净化步骤。这一改变旨在减少样品基质效应,提高目标物检测灵敏度与准确性。
具体操作上,新标准要求使用C18反相固相萃取柱。首先将尿液样品调节pH至弱酸性范围(约pH3-5),然后通过SPE柱去除蛋白质和其他大分子杂质。收集洗脱液后再添加内标并定容至目标体积。此过程能够有效去除尿液中的色素、脂肪酸等干扰成分,确保最终测定结果更加可靠。
值得注意的是,在实施过程中需特别关注以下几个关键点:一是调节pH值时应精确控制,避免因pH偏差导致目标化合物结构变化;二是洗脱流速不宜过快或过慢,以免影响回收率;三是定期维护和校准SPE柱以保证其性能稳定。
通过引入固相萃取技术,TCRHA 060-2024显著提升了尿液有机酸检测的质量控制水平。实验室技术人员应当严格按照标准要求执行样品前处理步骤,并结合实际工作经验不断优化操作流程,从而为临床提供更为准确可靠的检测数据支持。