DB53T 1064.2-2021 绿孔雀检疫技术 第2部分：禽流感病毒实验室检测技术规范

摘要：本文件规定了绿孔雀禽流感病毒实验室检测的样品采集、运输与保存、核酸提取、RT-PCR和荧光定量PCR检测方法及结果判定。本文件适用于绿孔雀禽流感病毒的实验室检测。
Title：Quarantine Technology for Green Peafowl - Part 2: Laboratory Detection Technique Specification for Avian Influenza Virus
中国标准分类号：B46
国际标准分类号：11.220

DB53/T 1064.2-2021《绿孔雀检疫技术 第2部分：禽流感病毒实验室检测技术规范》是云南省发布的关于绿孔雀检疫的重要地方标准。以下是对该标准中关键条文的详细解读：

### 样品采集与处理

**条文解读：**

- **采样部位的选择**：标准明确指出，样品应从绿孔雀的泄殖腔和喉拭子采集。这是基于禽流感病毒主要存在于这些部位的特点，确保了样本的有效性。

- **样品保存与运输**：要求将采集的样品立即置于含有病毒保存液的无菌采样管中，并在4℃条件下保存不超过24小时，若需长时间保存则需置于-70℃以下。这一规定旨在保持病毒活性，避免因温度变化导致病毒失活。

### 实验室检测方法

**条文解读：**

- **RT-PCR检测**：标准推荐使用实时荧光定量RT-PCR法进行检测。这种方法具有高灵敏度和特异性，能够快速准确地检测出禽流感病毒的存在。具体操作时，需严格按照试剂盒说明书执行，并设置阴性和阳性对照以保证结果可靠性。

- **病毒分离培养**：当RT-PCR检测呈阳性时，建议进一步通过鸡胚或细胞系对病毒进行分离培养。此步骤有助于获得纯化的病毒株，为后续研究提供基础材料。

### 结果判定与报告

**条文解读：**

- **结果判定原则**：根据RT-PCR扩增曲线及Ct值判断是否感染禽流感病毒。通常情况下，Ct值小于设定阈值则视为阳性；反之则为阴性。同时，结合临床症状和其他辅助检查综合分析最终结论。

- **报告格式要求**：所有检测数据必须真实完整地记录于专用表格内，并由两位以上专业技术人员审核签字确认后方可出具正式报告。此外，还需注明检测日期、样品来源等信息以便追溯。

### 注意事项

- 在整个实验过程中，必须严格遵守生物安全防护措施，包括穿戴适当的个人防护装备、正确处理废弃物以及定期消毒工作区域等，防止交叉污染。

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