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摘要:本文件规定了滇金丝猴肠道微生物组数据获取的技术要求,包括样本采集、处理、DNA提取、测序及数据分析等环节的操作规范。本文件适用于滇金丝猴肠道微生物组研究及相关领域的数据获取工作。
Title:Technical Specification for Data Acquisition of Gut Microbiome in Rhinopithecus bieti
中国标准分类号:B45
国际标准分类号:07.100.99
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拓展解读
DB53/T 1057-2021《滇金丝猴肠道微生物组数据获取技术规程》是一项专门针对滇金丝猴这一珍稀物种肠道微生物研究的技术规范。以下从该标准的重要条文中选取关键内容进行详细解读:
样品采集
标准中明确指出,样品采集应在清晨进行,以确保样本的新鲜度和代表性。采集工具需经过严格灭菌处理,并且在操作过程中要避免外界环境对样本的污染。此外,还规定了具体的采样量以及保存条件,如样本应立即置于-80℃冷冻环境中直至后续处理。
样品预处理
样品预处理部分强调了样品解冻后的均质化过程,要求使用无菌设备将样品充分混合均匀,以保证分析结果的一致性。同时,对于不同部位的样品还需采取相应的预处理措施,比如通过特定的酶解法来提高DNA提取效率。
DNA提取与质量检测
在DNA提取环节,标准推荐了几种高效的方法,并详细描述了每种方法的操作步骤。特别注意的是,所有试剂都必须是高质量的,并且在整个提取过程中都要防止外源DNA的污染。关于DNA质量检测,则给出了具体指标,包括OD260/280比值应在1.8左右,OD260/230比值大于2.0等。
数据分析
数据分析章节提供了详细的指导方针,包括序列拼接、OTU聚类、分类学注释等一系列流程。其中,特别提到对于每个样本至少需要生成10万个有效序列才能保证结果可靠。另外,在进行统计分析时,建议采用多种算法交叉验证,以提高结论的准确性。
以上是对DB53/T 1057-2021中一些重要条文的深入解析。这些规定不仅有助于科研人员更准确地获取滇金丝猴肠道微生物组信息,也为保护这一濒危动物提供了科学依据和技术支持。